名前	声優	出自
雪村千鶴	桑島法子	主人公（名前のみ変更可能）。蘭学医の父・雪村綱道を捜すために京を訪れ、新選組隊士達と出会う。
土方歳三★	三木眞一郎	新選組副長。鬼の副長と呼ばれるほどに厳しいが、全ては新選組と近藤のためと考えて行動している。
沖田総司★	森久保祥太郎	新選組一番組組長。天才的な剣士。冗談か本気か分からない口調で普段は飄々としている。
斎藤一★	鳥海浩輔	新選組三番組組長。居合の達人（本作では左利き）。寡黙な一匹狼だが、冷静な判断力と行動力を持つ。
藤堂平助★	吉野裕行	新選組八番組組長。最年少幹部。戦いでも先陣を切り、何事にも真っ先に飛びつくやんちゃ気質。
原田左之助★	遊佐浩二	新選組十番組組長。剣よりも槍の名手。少々短気なところもあるが人情に厚く義理堅い。
風間千景★	津田健次郎	何かと新選組や千鶴に関わる剣士。西の鬼の頭首。薩摩藩に属している。

サブキャラクター

名前	声優	出自
近藤勇	大川透	新選組局長。剣術にも長け、何より人情深く涙もろい。皆の信頼を集める大将。
山南敬助★	飛田展男	新選組総長。にこやかな笑みを浮かべながら、冷酷な策士の顔も見せる（実在する隊士の名字は「やまなみ」読みとする説もあるが、本作では「さんなん」読みとなっている）。
永倉新八★	坪井智浩	新選組二番組組長。剣術では新選組一ともいわれる腕だが、酒と女好きな一面も持つ兄貴気質。
井上源三郎	小林範雄	新選組六番組組長。年長者幹部であり、優しく見守る誠実な人柄で皆に信頼されている。
山崎烝★	鈴木貴征	新選組諸士調役兼監察。冷静沈着な監察方として影から新選組を支え、土方を尊敬している。
島田魁	大羽武士	新選組諸士調役兼監察、伍長、軍監。新選組を影から支える縁の下の力持ち的存在。
伊東甲子太郎	千々和竜策	新選組参謀、後に御陵衛士隊長。近藤に博識と剣の腕を買われ新選組に入る。
雪村綱道	齋藤龍吾	千鶴の父親（養父）であり、羅刹を生み出す変若水という薬を作った本人。
南雲薫	伊藤葉純	千鶴が町で出会う少女。
天霧九寿	山口りゅう	風間や不知火と行動を共にする鬼。風間と同じく薩摩藩に属する。
不知火匡	吉田裕秋	銃を使う鬼。長州藩に属する。
千姫	石川綾乃	千鶴が町で助ける少女。鈴鹿御前の子孫で、鬼の姫。
君菊	勝田晶子	表向きは島原の芸妓だが、正体は千姫に仕える忍び。
松本良順	佐藤広太	幕府と新選組お抱えの蘭医であり、千鶴と綱道の知り合い。
榎本武揚	伊藤栄次	幕府海軍副総裁、蝦夷共和国総裁。
大鳥圭介	内匠靖明	幕府陸軍伝習隊総督、蝦夷共和国陸軍奉行。

主題歌

作品名	OP	作詞・編曲・歌	ED	作詞・編曲・歌
薄桜鬼〜新選組奇譚〜	はらり	吉岡亜衣加	ココニイル〜虚空の果て〜	吉岡亜衣加
薄桜鬼ポータブル	闇の彼方まで	日山尚・上野義雄・吉岡亜衣加	想い出はそばに	上園彩結音・末廣健一郎・吉岡亜衣加
薄桜鬼随想録	花びらの刻	上園彩結音・編曲・上野義雄・吉岡亜衣加	空の鏡	上園彩結音・末廣健一郎・吉岡亜衣加
薄桜鬼〜新選組奇譚〜 (TVアニメ)	十六夜涙	Yumiyo・谷本貴義・太田美知彦・吉岡亜衣加	君ノ記憶	mao・安瀬聖・mao