2人の関係性はアニメ本編冒頭である2話Aパート「就職しよう」から判明している。
居酒屋にて、兄弟達から社会不適合をからかわれるも何の反応もしなかった一松は、唯一自分をフォローするような発言をしたカラ松に対して、すかさずその胸倉を掴んで涙目にさせた。
その対応の違いは、おそ松曰く「カラ松にいじられた時の一松はヤバい」とお墨付き。

体現するように、その他の回でも基本的に一松はカラ松への当たりが飛び抜けて強い。
スルーする事もあるが、カラ松の言動に対して兄弟の中でも特に一松が攻撃的な対応（もしくは無視）をとるのは定番のようだ。ただし、素の弱い次男はあまりやり返す事もなく、時に涙目にすらなっている（カラ松の声優曰くカラ松にとっての一松は「恐怖の対象」との事）。

更に、1クール目を経た時点では、一松がカラ松を名指しする場面では「クソ松」と名前すらろくに呼んでいなかった（そもそも一松は他の兄弟の名前を殆ど呼んでいないが）。

このように殺伐（？）とした間柄が見られる2人だが、一概に仲が悪いとも言い切れない。
6つ子揃って他の兄弟と共に喧嘩することもあるが、後述する内容も考慮すると、一松は（8話Bパートなど一部例外もあるが）イタくないカラ松には割りと普通に対応し、短い日常会話程度の会話もするようだ。
2話Aパートのシーンでも、居酒屋の帰りに酔い潰れた一松をカラ松が背負って帰る姿が見られた。

因みにスペシャル上映イベントで、二人は揃って酒に弱い体質だと明言されている（飲む事は飲むようだ）。この居酒屋シーンでは、2人の前にだけ他の兄弟と違ってビールではない透明な飲み物が入ったグラスが置かれていた。

4話Bパート「トト子なのだ」

憧れのトト子に呼ばれてお洒落してくるものの、一松がエレキギターを持ったロッカーのような姿、カラ松がワイングラスを片手に持った風呂上がりのバスローブ姿と、両者共にに凄まじいファッションセンスを披露した。

5話Aパート「カラ松事変」

カラ松が誘拐された時には素なのか否か喜び踊り、終いには「カラ松って誰？」と次男の存在を無下にした。
その後、チビ太に火炙りにされたカラ松に対して兄弟が鈍器を投げつける際には、一松だけが石臼という最大の重量物を最後に投げていた。ウザいを通り越して殺意まで湧いている気がする。

6話Aパート「おたんじょうび会ダジョー」

カラ松のイタ発言に間髪入れずバズーカを打っ放している。

8話Bパート「トト子の夢」

6つ子のアイドルことトト子に対してカラ松が単刀直入かつ真っ当な意見を述べた際、衝撃を受けて凍り付く他の兄弟を差し置いて飛び出した一松は、またもやカラ松の胸倉を掴み、ドスの利いた声で威圧した。
「黙ってろクソ松……殺すぞクソ松！」

劇中で一松からカラ松へ直接発せられた初のセリフがコレである。

9話Bパート「恋する十四松」

ここでも一松はカラ松を「クソ松」呼ばわりしたり、おでん屋でおそ松とチョロ松が喧嘩になった時にどさくさに紛れて一松がカラ松の足を「くたばれ」と言いながら踏みつけてカラ松と喧嘩になっていた。

10話「イヤミチビ太のレンタル彼女」

一松がカラ松のサングラスで楽しそうにネコをじゃらすという、やはりお決まりの扱い。
その直後サングラスが壊されたが、これを傍らで見ていたカラ松の方は怒る事も無く、その一部始終をただ困惑したように見ているだけだった。

11話「クリスマスおそ松さん」

クリスマス会プレゼント交換において、6つ子同士でのシャッフルの末、カラ松が引き当てたのがトド松。そして一松の手に渡ったのは、片面にビッシリと金箔をあしらったGREAT☆な青い袋……
「……神よ……ぉぉ神よ……」
チョロ松「残念だったね」

かつて胸倉掴んで泣かせた兄によって、今度は自身が泣かされた瞬間であった……。

14話Aパート「風邪ひいた」

トド松について普通に会話している様子がさりげなく描かれていた。短い会話だが、劇中において初めて会話のキャッチボールが成立した場面であった（両者とも風邪をひいており、カラ松の発言に特にイタい箇所が無かったためと思われる）。

その後チョロ松が、いつの間にか布団から出ていた一松の行方を尋ねると、カラ松は「あぁ治ったらしい。看病してくれるって」と返していた。

14話Bパート「トド松のライン」

屋根の上で一人セッションを始めようとしたカラ松が猫に驚いて落下したのだが、その猫は部屋に入って真っ先に一松に撫でられていた（明確に消しかけたのかは不明）。
因みに屋根から落ちた結果、カラ松は血みどろになった。普通に部屋に戻ってきたが。

15話Cパート「チビ太の花のいのち」

見た目も中身も超絶ドブスな花の精に尽くし、その姿を心配した兄弟達の忠告も「傍に居てやらないと」と意に介さないカラ松を一松は表情一つ変えず「ぽいわー。っぽい」と評していた。

16話Bパート「一松事変」

今までろくに名前を呼んでいなかった一松だが、モノローグなどでは普通に「カラ松」と呼んでいることが判明。ついでに「カラ松兄さん」とも呼んでいた。カラ松もこの回で初めて一松の名前を呼んでいる。

実は一松はカラ松のファッションに憧れている事が発覚。何だかんだ仲の良い兄弟であった。
更に、立て続けでカラ松の優しさに触れたことから、勢いで「俺はもうカラ松ボーイズだよおおお！！！」と心の中で叫んでいた。あらぬ疑いがカラ松にかけられてしまったが。

17話「十四松まつり」

十四松は何故現在のような性格になったのかを、十四松以外の5人が話し合っている中、カラ松が「その辺どうなんだ一松？彼奴と一番一緒に居る時が多いだろ」と一松に問いかけていた。
その際一松は、別に冷たい態度をとるわけでもなく、「なんで俺に！？」と一瞬びっくりしながらも、十四松について語り始めた。

18話Bパート「逆襲のイヤミ」

イタい妄想を語るカラ松を一松が体当たりで崖から突き落としていた。

22話Aパート「希望の星、トド松」

合コンメンバーオーディションにて一松の番の際、女装したトド松の隣でだんまりになってしまった一松に対してカラ松が「何でも良いから…」「話すんだ」と会話を催促した。

また、一松がカラ松の番のカチンコ（クソ松と書かれている）を鳴らす役を非常に嫌そうにキレながらやっていたり、あまりにイタ過ぎて穴に落とされたカラ松の落ちた穴をチョロ松と共にセメントで埋めていた。

23話Aパート「灯油」

こたつに入ろうとしたカラ松より先に一松が場所を陣取り真顔で無言の圧をかけていたり、その後のBパート「ダヨーン族」では、伸びる伸びるとダヨーン化したおそ松の頬を引っ張る十四松を受け、悪い顔をした一松が「ははっ、のびーーーる！」と言いながらダヨーン化したカラ松のダヨーンを引っ張り、カラ松が焦りながら「いやそこは伸びないから！」と突っ込んでいた。

また、非常に分かりにくいが、ダヨーン化したチョロ松が元の世界に戻りたくないと嘆いている時に、カラ松が一松の胸ぐらを掴み一松も悪びれず平然としているという普通の男兄弟らしいリアクションを見せている。

24話Bパート「手紙」

チョロ松の就職を祝っていた際にチョロ松がこみ上げるものを堪え、場がしんみりしてしまった時に一松が「この空気やめない？耐えられないんだけど」と打ち出し、隣のカラ松も同意していた。

また、就職祝いの最中におそ松が十四松を蹴飛ばした際、カラ松はおそ松を殴って外へ連れ出す。その後を追おうとするチョロ松だが、一松が「大丈夫だから」と止めている事から、一松がカラ松の事を信用している事が伺える。

25話「おそまつさんでした」

カラ松の「武道館でワンマンライブ」というセンバツで優勝した時の夢に一松が「いいなぁ」と発言。
兄弟それぞれの夢を語りそれに賛同する流れで一人だけ思わず口走ってしまったようで、一松は自分の発言にしまったとショックを受けながら頭を抱え、カラ松はフフンと誇らしげにしていた。

また、ピッチャーカラ松の球が打たれまくった後、グラサンをとったカラ松に一松が目潰しをしていた。

【第2期】

2話Aパート「祝・就職！！」

酔った2人が「おい、チョロ松も何かやれ」「え！ケツからおでんを食うだって！？」とからかっていた。

2話Bパート「超洗剤」

「出っ歯総会」でイヤミがトイレに行こうとする際の背景で一松がカラ松に酒を飲ませる描写が一瞬映っている。
また、超洗剤を飲んだ際に一松が「これ何の酒？」と聞くが、カラ松は「酔いすぎて分からん」と返し皆で大笑いしていた。

その後、盛りすぎなボディペイントを塗ったトド松にカラ松が「自己愛が過ぎるぞ」と呆れながら言うが、直後に一松に「お前が言うか！！」とキレながらツッコまれた。
しかし、カラ松「ん？」と分かってなかった様子。

5話「夏のおそ松さん」

"サマー仮面"と名乗るカラ松を前にして、「誰だ貴様（貴サマー → summer）」とさりげなくノってあげる一松の姿が見られた。

5話「今年こそは」

水着のガールズウォッチングの為にカラ松に借りたサングラスの便利さを他４人が褒める中、一松に感謝されないことを不服に思ったのか、「ン～？」と一松の方を向くカラ松。そして「サングラス、今すぐ返してもらっても良いんだが？」と付け加えた。
ビキニ姿のガールズたちの魅力に勝てなかった一松は「あっ…あ、あざっす」と今回は心の中ではなく言葉でお礼を言った。お礼を言われたカラ松は満足そうに親指を立てていた。

その後、カラ松がナンパを即諦めた直後に、「じゃあおれが行く」と立ち上がる一松。カラ松は兄弟と共に「無理はやめておけ一松」「心配だ」と声を掛けていた。
そして案の定挫折する一松の姿を見て、「フン！ということはついにオレの出番かなブラザー」と立ち上がるが、やっぱり誰も乗ってこなかったので諦めて座りなおした。

9話Aパート「キャンペーン発動！」

寝られない一松にカラ松が自慢の子守唄を歌おうとするが、口にマトリョーシカをつっこまれた。

また、一松が騒いだ際にカラ松が起きた時には床ドンしながら「ああ、ノープロブレムだブラザー、グッナイバイバイフォーエバー」とカラ松語を駆使して寝かしつけた。その他、一松がキレて全員を起こす際にはカラ松に往復ビンタをかましていた。
一松がキャンペーンを発動した翌朝、冷蔵庫から取り出した牛乳をパックごと直接飲もうとしたカラ松は一松が監視しているのに気づき、慌ててコップに入れ直した。

10話Aパート「カラ松とブラザー」

一松がカラ松に家にかかってきた電話に出て欲しいと頼んだり、ネコの糞の処理なども頼んでいた。
また、何でも頼まれる事を彼は嫌に思っているのではないかとチョロ松が指摘した時、一松はおそ松と共に謝ったり、「まぁでも、断らないと思って色々と押し付けた部分もあるよね。パシリとか」と反省していた。

13話「年末」

「年末ジャンボ」では、丁度おそ松から去ったばかりの一松をカラ松が公園の最深部にあった宝くじ売り場へと誘った。
凄く危険な雰囲気が漂う事に危機感を抱きつつも、大金を得たいという野心で意気投合した彼らは猛ダッシュで意気揚々と駆け込んでいった。

カラ松「すいませぇえええん！！！」
一松「宝くじ下さぁあああい！！！」

だが、その直後に近くに生えていた食虫植物に食べられてしまい、骨しか残らない程ドロドロに溶かされた状態で死んでしまった。

13話「雪遊び②」

自分自身の雪の像を作って満足げだったカラ松を、一松はいつぞやの回のような真顔で躊躇無く雪像もろとも大型トラックで轢いてしまった。

13話「年賀状」

嘘だらけの年賀状を書いたチョロ松を二人で「盛るなチョロ松！」と非難し、実際に彼がそのままポストに出そうとした時は兄弟揃って全力で止めようとしていた。

14話「チョロ松事変」

チョロ松の全く似合っていない茶髪を見た一松・十四松・トド松がドン引きしている中、状況を知らないカラ松は「こんな頭自分でやるわけない。（中略）お前らがチョロ松に命令したんだよな！」とフォローのつもりが結果一番チョロ松を傷付けてしまった。一松は「悪気がないだけに余計タチが悪い」と心の中で呟いていた。

19話「バレンタインデー」

六つ子が何とか可愛い女の子からチョコを貰おうと外出を決意する。一松も「わかった…今年のバレンタインは…外出しよう」と珍しく前向きな姿勢を見せ、嬉しくなったカラ松は「ハッハー！どうだ今年の俺達は一味違うぜ！」と肩を寄せていた。

22話「海外旅行」

無人島に流れ着いたトイレットペーパーを独り占めしようと持ち去るカラ松に対し、トド松と共に「コラァクソ松！」と久々のクソ松呼びを見せた。

23話「深夜の日松屋③」

飲食店で酔っ払った六つ子がそれぞれに似合う職業を話し合う。カリスマモデルを勧められたカラ松に対し、一松は「モノが違うよね～」とコメントする。また、医者を勧められた一松に対し、カラ松は「地頭がいいんだよな～」とコメントしていた。

24話「桜」

チビ太の屋台で働き始めた一松が客の皿を片付けると、酔っ払ったカラ松が現れ「おーブラザー！来てくれたのかセンキュー！」と声を掛ける。一松は「絡むな絡むな…」と冷たくあしらう。
客はカラ松の知り合いらしく、「おいみんな！俺の愛するブラザーを紹介させてくれ！」と言いだすが、一松は「いいからそういうの。大人しく飲んでろよ」と去ってしまう。
しかし一度振り返った一松は、「ははは、松野っていちいち発言が痛いんだよな～」「痛いよね～こいつ」と言われながら楽しく飲むカラ松の姿を見ると、「へっ、どこ行っても同じ扱い」と呟きながら微笑んでいた。

25話「地獄のおそ松さん」

自分だけ天国へ行こうとしたカラ松を蹴り飛ばし、天国は自分だけだと主張する一松。そこから作中初と言っても良い対等な兄弟喧嘩に発展し、「ブラザーさっさと地獄へ行けー！」「いいやお前だろ地獄はー！」と言いながら取っ組み合いをしていた。
そして閻魔大王から「誰が地獄に行くべきか"せーの"で指さしてみれ」と指示された際には、一松はカラ松を、カラ松は何故かチョロ松を指していた。

その後、仲間たちの協力により地獄から抜け出すチャンスをもらえた六つ子たち。その最中にカラ松が一松の肩を支えて走る場面が挿まれた。